STEM-CELLBANKER ^®GMP 级

（化学定义的冷冻保存溶液））

CELLBANKER^®系列特点 ⁄ HSC-BANKER ^® GMP 级 ⁄ STEM-CELLBANKER ^® GMP 级 ⁄ STEM-CELLBANKER ^® DMSO Free GMP 级 ⁄ CELLBANKER^®1 ⁄ CELLBANKER^®2 ⁄ CELLOTION^®细胞清洗和回收方案

产品信息

描述

STEM-CELLBANKER^®是一种化学成分明确的冷冻溶液，具有用于干细胞和 iPS 细胞以及其他有价值细胞储存的优化配方。此外，最近的数据支持它对组织进行冷冻保存的能力。它完全不含血清和动物衍生成分，仅包含 USP、EP 或 JP 分级成分。它通过简单的协议即可使用，同时提供更安全和有前途的干细胞和 iPS 细胞的冷冻保存。
STEM-CELLBANKER ^® GMP 等级的制造符合日本、欧盟、美国和 PIC/S GMP 指南。

优点

显着提高细胞活力，同时在冻融程序后保持细胞多能性、正常核型和增殖能力。
可用于在 DNA 和 RNA 水平上无损伤地冷冻保存组织。
使用优质成分进行更安全的冷冻保存，无污染动物源性成分的风险，批次间稳定性。
完整配方，无需进一步制备，-80℃直接冷冻，无需可编程冷冻机等，节省成本/时间/步骤。
严格按照 GMP 监控的高质量产品。
※2017年，Zenoaq提交的STEM-CELLBANKER ® GMP等级的生物制剂主文件（BMF）被美国食品药品监督管理局CBER（生物制剂评估与研究中心）接受。

包装

20ml、100ml/瓶

应用

① 使用 STEM-CELLBANKER ^®对 hESC 和 iPS 细胞进行冷冻保存分析

作者：卡罗林斯卡医学院临床科学、干预和技术系

测试细胞系：HS293 & HS306 (hESC)；ChiPSA (human iPS)
冷冻培养基：STEM-CELLBANKER ®与传统冷冻培养基（10% DMSO 在血清替代培养基中）
细胞活力评估：基于台盼蓝和钙黄绿素酯酶的活-死检测

结果：在HS293、HS306和ChiPSA细胞系中观察到细胞活力显着提高，而细胞多能性、正常核型和增殖能力得以维持。

＊我们非常感谢 Outi Hovatta 教授和 Frida Holm 女士的上述分析。

② 使用 STEM-CELLBANKER ^®对间充质干细胞 (MSCs) 和内皮祖细胞 (EPCs) 进行冷冻保存分析。

MSCs EPCs
STEM-CELLBANKER ® >95% >90%

被测细胞系：人UCB衍生的MSCs和EPCs
冷冻培养基：STEM-CELLBANKER ®
冷冻方案：细胞直接在-80℃冷冻3天，转移到-192℃72天。
细胞活力评估：台盼蓝染色法。

结果：观察到MSCs和EPCs的细胞活力高达或超过95%，EPCs的细胞活力达到或超过90%，而受试细胞的细胞增殖能力和分化能力保持不变。
详见MSC或EPC

＊我们非常感谢Osamu Ohneda教授和Masumi Nagano博士的上述分析。

③小鼠 ES 细胞 (129SV) 冻存分析

测试细胞系：129SV（小鼠 ES 细胞）
冷冻培养基：CELLBANKER 1、1plus、2 和 STEM-CELLBANKER ®

协议（CELLBANKER ^®系列）

冷冻

为获得最佳结果，冷冻保存的细胞应处于对数生长期。可以替代类似或标准的冷冻方案。

1.检查并确保细胞培养物无污染、健康状况和适当融合等。
2.进行细胞计数以确定细胞的活力
3.轻轻离心沉淀细胞（3 – 5 分钟，1,000~2,000rpm，4℃）。使用吸气器去除上清液。
4.用 CELLBANKER_ 冷冻保存培养基轻轻悬浮细胞（1 ml 用于 5×105 – 5×106 细胞。
5.将细胞悬液以 1ml 等分试样分装到已标有细胞系名称、细胞浓度、传代日期和其他重要信息的冷冻保存小瓶中。
6.将小瓶直接置于-80℃保存。如有必要，在小瓶冷冻至少 24 小时后，将冷冻小瓶转移到液氮储罐中。

重要提示：最佳方案可能会随细胞类型而变化。

解冻

1.从储存中取出冷冻细胞，并在 37°C 振荡水浴中快速解冻。
2.立即将每 1ml 细胞与 10ml 完全细胞培养基稀释并轻轻混合。
3.轻轻离心沉淀细胞（3-5 分钟，1,000 – 2,000rpm，4°C）。取出上清液抽吸器。
4.用适当体积的完全细胞培养基轻轻悬浮细胞。并放入培养瓶中。
5.根据标准协议继续进一步的培养程序。

④ 使用 STEM-CELLBANKER ^®冷冻保存小鼠肾脏组织

作者：ZENOAQ 细胞工程团队

冷冻保存和解冻的肾组织。

新鲜的肾组织

将小鼠肾脏切碎成约5mm见方。组织样本立即用 10% 福尔马林固定或用 1 ml STEM-CELLBANKER 在-80°C 下冷冻保存一周。冻存样品解冻后立即用10%福尔马林固定。两个样品的石蜡切片均用 H&E 或抗活性 caspase 3 抗体染色。在新鲜和冷冻保存的组织样品中，坏死或细胞凋亡的迹象都可以忽略不计。在来自各种小鼠器官的组织样本的情况下，也获得了类似的结果。

⑤ 用 STEM-CELLBANKER ^®冷冻保存细胞后的 mRNA 保存

从小鼠肺成纤维细胞系的细胞中提取总 RNA，在收获后立即或在 -80°C 下用 STEM-CELLBANKER 冷冻保存一周并解冻后。将两个样本中的mRNA水平进行比较DNA微阵列分析，结果显示93%的mRNA在±1.6倍的差异范围内。

参考（最受欢迎的出版物）

•岛津等人。(2015) 人脐带组织作为间充质基质细胞来源的无血清和无异源冷冻保存。细胞疗法，2015；17：593 – 600。
•中川 M 等人。(2014) 一种用于衍生人类诱导多能干细胞的新型高效无饲养层培养系统。科学报告 4 文章，编号：359。
•宫本 Y 等人。(2012) 诱导多能干细胞的冷冻保存。细胞医学。，卷。3，第 89-95 页，2012 年。
•萨利姆 M 等人。(2012) 使用新的无异种冷冻保护剂溶液改进了人类肝细胞的冷冻保存。世界肝病杂志。5 月 27 日；4(5):176-83。
•霍尔姆等人。(2010) 一种有效的无血清和无异种化学成分的人胚胎和诱导多能干细胞冷冻程序。嗡嗡声。25（5）：1271-9。Epub 2010 年 3 月 5 日。
•中村 A 等人。(2010) 人原代培养的肝星状细胞可以冷冻保存。医学分子吗啡。43：107-115。